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如何克服色譜溶劑檢測(cè)干擾?

更新時(shí)間:2023-12-12      點(diǎn)擊次數(shù):887

快速色譜法是純化反應(yīng)混合物和天然產(chǎn)物提取物的重要工具?,F(xiàn)代快速色譜儀器配備了紫外檢測(cè)器來(lái)觀察洗脫的化合物并觸發(fā)其收集。然而,用于分離各種混合物成分的溶劑有時(shí)會(huì)掩蓋或降低其可檢測(cè)性,從而降低其純度和回收率。

那么,你可以做些什么來(lái)緩解這個(gè)問(wèn)題呢?

那么,您可以嘗試一些選擇,包括更換溶劑(例如,將乙酸乙酯改為丙酮或 MTBE)或使用能夠?qū)崟r(shí)消除溶劑紫外線(xiàn)吸收(又稱(chēng)基線(xiàn)校正)的閃蒸系統(tǒng)。兩者都有各自的優(yōu)點(diǎn),但本文重點(diǎn)討論基線(xiàn)校正。

Biotage® Selekt 等 Flash 系統(tǒng)提供實(shí)時(shí)基線(xiàn)校正。該功能消除了運(yùn)行過(guò)程中溶劑造成的任何紫外線(xiàn)吸收,從而使紫外線(xiàn)吸收溶劑無(wú)法檢測(cè)到的化合物變得對(duì)檢測(cè)器可見(jiàn)。

例如,靛紅酸酐和芐胺的反應(yīng)產(chǎn)生了所需的產(chǎn)物和一些副產(chǎn)物。使用 5 克硅膠柱 (Biotage® Sf?r HC) 和庚烷/乙酸乙酯梯度進(jìn)行快速色譜法僅檢測(cè)產(chǎn)品,因?yàn)榛€(xiàn)隨著乙酸乙酯梯度的增加而上升,圖 1。

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圖 1.使用庚烷/乙酸乙酯梯度純化反應(yīng)混合物,并使用 UV 檢測(cè),無(wú)需基線(xiàn)校正,隱藏了粗反應(yīng)混合物中的副產(chǎn)物。

為了可視化反應(yīng)中產(chǎn)生的副產(chǎn)物,啟用系統(tǒng)基線(xiàn)校正功能(通常是默認(rèn)方法參數(shù))的純化消除了這個(gè)問(wèn)題,圖 2。

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圖 2.啟用基線(xiàn)校正的反應(yīng)混合物純化揭示了隱藏的副產(chǎn)物。

因此,如果紫外線(xiàn)基線(xiàn)上升導(dǎo)致您出現(xiàn)檢測(cè)問(wèn)題,請(qǐng)考慮具有基線(xiàn)校正功能的閃光系統(tǒng)。



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