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核酸凝膠染料應(yīng)該如何進(jìn)行選擇?

更新時(shí)間:2025-03-26      點(diǎn)擊次數(shù):292

SPEED Biosystems 擁有一系列核酸凝膠染料,包括用于凝膠前和凝膠后染色的 GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™,以及用于電泳前與核酸混合的 SafeGreen™ 和 SafeRed™ 上樣染料。這些染料是下一代熒光核酸凝膠染料,旨在替代高致突變性溴化乙錠 (EB)。這些染料兼具高靈敏度、低毒性和穩(wěn)定性,優(yōu)于 EB。EB 因其成本低且通常具有足夠的靈敏度而被廣泛用于核酸凝膠染色。然而,EB 具有高度誘變性。與凈化和廢物處理相關(guān)的安全隱患和成本最終會(huì)使染料變得昂貴且使用不便。


用于凝膠前和凝膠后染色的凝膠染料(GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™)

優(yōu)勢

★ 比 EB 更安全。Ames 試驗(yàn)和其他試驗(yàn)顯示無突變性和無細(xì)胞毒性。

★ 常溫下穩(wěn)定。

★ 與標(biāo)準(zhǔn)藍(lán)光 LED 和 UV 透射儀兼容。

★ 與藍(lán)光一起使用可減少凝膠切除和后續(xù)克隆的誘變。


核酸凝膠染料應(yīng)該如何進(jìn)行選擇?

圖 1.使用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的凝膠染色結(jié)果(左圖),以及使用 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 的比較結(jié)果(右圖)。左圖:將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)(NEB,貨號(hào) # N0468S)的兩倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng(從左到右)的量分分 3 個(gè)泳道上加載到每塊凝膠上,然后用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 進(jìn)行后染色。右圖:結(jié)果顯示 GreenView™ 與 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 具有相似的靈敏度,GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的靈敏度要好得多。

圖 2.使用 RedView™ 和 GelRed™ 進(jìn)行凝膠染色結(jié)果。將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)品的 2 倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng(從左到右)的量分裝到 3 個(gè)泳道的每塊凝膠上,然后分別用 RedView™ 和 GelRed™ 進(jìn)行后染色。結(jié)果顯示 RedView™ 與 GelRed™ 具有相似的靈敏度。


除了比 EB 更安全之外,與 SYBR Safe DNA 凝膠染料相比,GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 的細(xì)胞通透性降低,使其更安全(圖 3)。

圖 3.使用 SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 進(jìn)行細(xì)胞通透性測試。Hela 細(xì)胞在 37?使用 1X SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 30 分鐘。

GreenView Plus 和 RedView 無法穿透細(xì)胞膜以結(jié)合活細(xì)胞中的 DNA,并且比 SYBR Safe 安全得多,后者可快速進(jìn)入細(xì)胞并對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。

如何選擇適合您的 DNA 染色劑?

GreenView

GreenView Plus

GreenView Ultra

RedView


SKU

LYF1001

LYF1002

LYF1003

LYF1004

Ex/Em (nm)

488/530

488/530

488/530

488/530

Nonhazardous/
Environmentally friendly

Gel electrophoresis

dsDNA

ssDNA



RNA



Precast gel staining


Post-gel staining




Gel band excision for cloning


Excitation Source

Blue light/UV

Blue light/UV

Blue light/UV

UV

Recommended emission filter

SYBR filter

SYBR filter

SYBR filter

EB filter


























凝膠上樣染料(SafeGreen™ 和 SafeRed™)

優(yōu)勢

★ 在 6X 上樣緩沖液中配制,即用型。

★ 安全無毒,是 EB 的替代品。

圖 4.使用 SafeGreen™(左圖)和 SafeRed™(右)與 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)混合的凝膠染色結(jié)果。

SafeGreen™ 和 SafeRed™ 經(jīng)過專門設(shè)計(jì),不滲透細(xì)胞膜,從而通過防止染料進(jìn)入活細(xì)胞來降低遺傳毒性(圖 5)

圖 5.使用 SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 進(jìn)行細(xì)胞通透性檢測。將 Hela 細(xì)胞在 37oC 下與 1X SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 一起孵育 30 分鐘。SafeGreen™ 和 SafeRed™ 無法穿透細(xì)胞膜結(jié)合活細(xì)胞中的 DNA,比 SYBR Safe™ 安全得多,后者可快速進(jìn)入細(xì)胞并對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。

相關(guān)產(chǎn)品

GreenView™ DNA Gel Stain   貨號(hào) LYF1001

GreenView™ Plus DNA Gel Stain 貨號(hào) LYF1002

GreenView™ Ultra DNA Gel Stain 貨號(hào) LYF1003

RedView™ DNA Gel Stain  貨號(hào) LYF1004

SafeGreen™ Loading Dye  貨號(hào) LYF1005

SafeRed™ Loading Dye  貨號(hào) LYF1006



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