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腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase,AGP)活性

簡要描述:腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase,AGP)活性測定試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產品

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-04-26
  • 訪  問  量:613

詳細介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥

腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase,AGP活性測定試劑盒


AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。

測定原理

AGP催化的逆向反應生成G1P,在反應體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算AGP活性。

需自備的的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制

提取液液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入9mL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融;

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入4mL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融;

粗酶液制備 

按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至340nm,蒸餾水調零。

2、試劑一置30℃保溫10min以上。

3、在EP管中按順序加入下列試劑

試劑名稱(μL)

測定管

試劑一

50

試劑二

80

樣本

10

混勻,30℃保溫15 min,置沸水浴中1 min(蓋緊,防止水分散失),冰浴迅速冷卻后,4000g4℃離心5min,取上清液,在96孔板中依次加入下列試劑

上清液

80

試劑一

85

試劑三

35

混勻后,立即于340 nm波長下記錄初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2,計算ΔA=A2-A1。

 

AGP活性計算

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下:

1、按樣本蛋白蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活性單位。

AGP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T×稀釋倍數(shù)

                =2813×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

2、按照樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

AGP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T×稀釋倍數(shù)

                =2813×ΔA÷W

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.01mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;稀釋倍數(shù):1.75;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量。

b.使用96孔板測定的計算公式如下:

1、按樣本蛋白蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活性單位。

AGP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T×稀釋倍數(shù)

                =5627×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

2、按照樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘催化產生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

AGP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總)÷T×稀釋倍數(shù)

                =5627×ΔA÷WV反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;稀釋倍數(shù):1.75;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內試劑耗材經銷代理。

  2. 國外試劑的訂購??商峁W美實驗室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進出口貨物代理服務。

  5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質量保證,所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式,為客戶全面解決實驗、生產、開發(fā)需求。公司整合國際與國內資源,加強網絡建設,提高公司內部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價格。

腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylaseAGP活性測定試劑盒

















































































































  • 中文名稱:甲泛葡胺

  • 英文名稱:Metrizamide


分子式:C18H22I3N3O8

分子量:789.1

  • CAS號:31112-62-6

    級別:Reagent Grade

  • EINECS編號:250-475-5

  • 儲存條件:2~8℃

  • 中文別名:甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影

  • 英文別名:2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco

  • 是否危險:否





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甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide







































































































































































































































































































































































































































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